1 引 言

三脂肪酸甘油酯（ 甘油三酯） 由 1 個甘油分子與 3 個脂肪酸分子結合成酯而成，是食用油的主要成分。根據碳鏈的長度以及不飽和度，脂肪酸的種類可高達 800 余種。動物及植物油脂主要集中在含有0 ~ 3 個雙鍵的 C8~ C26的直鏈脂肪酸，同時由于結合位置的不固定，導致了甘油三酯的種類相較脂肪酸更趨向于復雜多樣[1].但常見動物油和植物油中主要存在的僅是含有 C16和 C18的甘油三酯，如脂肪酸為棕櫚酸（ C16∶ 0,P） 、硬脂酸（ C18∶ 0,S） 、油酸（ C18∶ 1,O） 、亞油酸（ C18∶ 2,L） 、亞麻酸（ C18∶ 3,Ln） 的甘油三酯。其它脂肪酸的甘油三酯含量普遍較低。

目前，在世界范圍內廣泛存在著食用油摻雜的問題，在中國尤以地溝油摻雜問題備受關注[2 ~4],甘油三酯作為食用油的主要成分，對其進行分離分析是一個值得關注的研究方向。高效液相色譜-質譜聯用技術（ LC-MS） 在分離分析甘油三酯方面具有獨特的優勢，不同的液相色譜柱可以對甘油三酯形成不同程度的分離，高靈敏質譜檢測器為分離后的定性識別與定量分析提供了重要條件。目前，用于分析甘油三酯的質譜離子源有 ESI 與 APCI 兩種離子源。ESI 源適用于檢測中等極性以及強極性的化合物，在使用 ESI 源時可利用多級質譜通過將甘油三酯分子打碎后得到的子離子峰，獲得對甘油三酯更好的定性分析結果[5,6].通常使用 ESI 源時需要在流動相中加入鹽類才會有好的離子化效果[7 ~9].APCI 源適用于弱極性化合物的檢測，甘油三酯在 APCI 源中主要形成 3 種類型的碎片離子： ?；x子（ RCO）+、單?；视碗x子（ M + H - RCOOH - RCO）+和二?；视碗x子（ M + H - RCOOH）+,根據這些碎片離子峰的特征，可以確定甘油三酯的結構[10 ~13].

本實驗使用串聯長柱建立了超高效液相色譜-質譜聯用（ UPLC-MS） 分析食用油中甘油三酯組成的方法。與普通的 HPLC 分離相比，本方法可以簡便地對食用油中的甘油三酯實現更精細的分離分析，從而可根據不同食用油之間甘油三酯的精細差異，區分常見食用油，并可檢測摻入少量豬油的大豆油。

2 實驗部分

2. 1 儀器與試劑

LCMS 2020 型超高效液相色譜儀（ 日本 島津公司） ,包括脫氣機、兩個 LC-30AD 泵、CTO-30A 柱溫箱、SIL-30AC 自動進樣器、SPD-M20A 二極管陣列檢測器及使用 APCI 源的質譜檢測器。數據分析軟件采用 LabSolution software （ version 5. 53） .三油酸甘油三酯、乙腈（ HPLC 級） 、異丙醇（ HPLC 級） 均購自國藥集團化學試劑有限公司。食用油樣品除豬油為自制外，其它均購自本地超市。

2. 2 實驗方法

2. 2. 1 樣品及其準備 （ 1） 液體樣品 移取 10 μL 樣品溶于 1000 μL 異丙醇中，濃度為 1% （ V /V） ,直接進樣。（ 2） 固體樣品 稱取 0. 5 g 溶解于 50 mL 正己烷中，濃度為 1%（ w/V） ,直接進樣。

2. 2. 2 色譜與質譜條件 液相色譜條件： Thermo Syncronis C18色譜柱（ 100 mm ×2. 1 mm,1. 7 μm） 與兩根月旭 Ultimate UHPLC XB-C18（ 150 mm ×2. 1 mm,1. 8 μm） 色譜柱串聯。流速為 0. 2 mL/min,流動相為乙腈-異丙醇（ 50∶ 50,V/V） 等度洗脫。進樣量為 1 μL.質譜條件： APCI 電離源，正離子電離模式，質荷比（ m/z） 范圍300 ~1050,霧化氣流速2. 5 L/min,干燥氣流速 5 L/min,APCI 溫度 250℃，DL 溫度 250℃，Heat 溫度 200℃，檢測器電壓 1. 05 kV.