1 實驗材料
平菇深層發酵產纖溶酶、胰酶、酪蛋白、人血纖維蛋白原、Tris（三羥甲基氨基甲烷）、0.02mol/L磷酸氫二鈉 - 檸檬酸緩沖溶液、0.02m ol/L 碳酸鈉 - 碳酸氫鈉緩沖溶液、0.02m ol/LNa2HPO4- NaOH緩沖溶液、0.02mol/L氯化鉀溶液- NaOH緩沖溶液。
2 實驗方案
2.1 平菇纖溶酶最適作用 pH 的確定
在用緩沖溶液配制的不同pH 值纖維蛋白平板上，用微量取液器分別加酶樣10μL,置37℃恒溫箱中保溫6h 后，測量透明溶圈直徑，并計算相對酶活力.
2.2 平菇纖溶酶 pH 穩定性
取適當體積的平菇纖溶酶液與等體積的不同pH值緩沖溶液混合后，置37℃恒溫箱中保溫 1h、3h、5h、7h、9h、11h、16h、24h 測定酶活，用PBS 做對照。
2.3 平菇纖溶酶最適作用溫度
取酶液 10μL點到血纖維平板上，分別置不同溫度保溫 6h 后，測定殘余酶活。
2.4 平菇纖溶酶溫度穩定性
取適量酶樣分別置不同溫度條件下作用，在0.5h,1h,2h,4h 時取樣迅速冷卻，取10μL點到血纖維平板上置 37℃恒溫箱中 6h,測定殘余酶活。
2.5 金屬離子對平菇纖溶酶活性的影響
選取6 種金屬離子，分別為 Cu2+、Co2+、Fe3+、Fe2+、Mg2+、Na+.將不同濃度的金屬離子溶液與纖溶酶液等體積混合，在37℃保溫18h 后取 10μL混合液點平板，37℃保溫 6h 后測定酶活。用雙蒸水代替金屬離子溶液作對照。
3 實驗方法
3.1 平菇纖溶酶最適作用 pH 的確定
將平菇纖溶酶在不同pH值血纖維蛋白平板中37℃保溫6h 后測酶活力.結果是平菇纖溶酶在pH值為7.2~7.8 的范圍內，相對酶活穩定在54%,表現出較好的作用效果。其最適pH值為7.4.
3.2 平菇纖溶酶 pH 穩定性
通過對1h、2h、3.5h、5h、24h 的相對酶活的統計，該酶在 pH為5.0~9.0 范圍內比較穩定。
3.3 平菇纖溶酶最適作用溫度
取適量酶樣分別置不同溫度條件下作用，取酶樣10μL點到血纖維平板上置37℃恒溫箱中6h 測定殘余酶活，可知平菇纖溶酶最適作用溫度為45℃，在 34 ℃~45℃均表現出較好作用效果，該范圍涵蓋人體正常生理體溫（37℃），具有開發為溶栓劑藥物的潛力。在18℃~45℃范圍內隨溫度的升高酶反應速度加快，酶活力升高；溫度高于45℃，酶活力下降。
3.4 平菇纖溶酶溫度穩定性
取適量酶樣分別置不同溫度條件下作用，保存 0.5h、1h、2h、3h,4h 取酶樣 10μL點到血纖維平板上置 37℃恒溫箱中 6h 測定殘余酶活，該酶在31℃至 45℃之間相對酶活穩定在 60% ~80% 之間，而在高溫時失活較快。
3.5 金屬離子對平菇纖溶酶活性的影響
金屬離子溶液和平菇纖溶酶純酶液各取20μL混勻，根據金屬離子對纖溶酶活性的影響，對實驗數據進行匯總得出在離子濃度為100m m ol/L時，Na+、Mg2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Co2+的相對酶活分別為 115.5786% 、 113.0103% 、 58.63971% 、 33.59125% 、 0% 、75.8416%,并統計 1m m ol/L、10m m ol/L的數據后可知隨著離子濃度增大時，Cu2+、Fe3+、Co2+、Fe2+離子對其產生抑制作用；Na+、Mg2+等離子對酶有激活作用。當離子濃度達到100mmol/L時，Fe3+離子能完全抑制纖溶酶的活性；Na+對酶的激活作用最為明顯.
4 結論
本文利用生物化學等實驗手段對平菇利用深層發酵產胞外纖溶酶活性物質進行部分酶學性質的研究，結論如下：
1） 此平菇纖溶酶的最適作用 pH 值為 7.4;在 pH5.0~9.0 范圍內該平菇纖溶酶的穩定性很好.
2） 此平菇纖溶酶的最適作用溫度為 45℃，在 45℃以上時酶活下降較快，在31~45℃時該酶較穩定，由此可見該酶在高溫時不穩定，但在人體正常體溫條件下可保持穩定。
3） 實驗選用的離子在離子濃度最大時 Cu2+、Fe3+、Co2+、Fe2+離子對其產生抑制作用，Na+、Mg2+等離子對酶有很明顯的激活作用。
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