血小板受體和細胞內信號分子的發現為抗血小板治療提供了新的研究方向，抗血小板藥物已廣泛用于動脈血栓形成的預防和早期治療，這些藥物以血小板的活化和聚集作為靶點。目前，抗血小板藥物主要有ADP受體類似物\\(如氯比格雷\\)、凝血酶受體類似物\\(如E5555\\)、血栓素形成抑制劑\\(如阿司匹林\\)、GPⅡb/Ⅲa受體抑制劑\\(如阿昔單抗和依替巴肽\\)等，其抑制血小板作用明顯，對防止血栓形成、溶栓治療、預防血管內再閉塞有明顯的作用，但它們的主要不良反應是出血傾向和血小板減少癥等。如阿昔單抗是人-鼠嵌合單抗，依替巴肽為蛇毒5肽，兩者均為異源蛋白，可引起免疫性血小板減少。因此，尋找一類有效、安全、價廉的抗血小板藥物已是當前的研究熱點。

結締組織生長因子肽\\(connectivetissuegrowthfactorpeptide，CTGFP\\)是一個來源于結締組織生長因子第4結構域的小肽\\(被命名為P1c，專利公開號101497656\\)，由17個氨基酸組成。有研究顯示:該小肽具有與人整合素αvβ3中的β3亞基特異性結合及有良好的抗血小板聚集的作用。本研究觀察了大鼠體內不同劑量P1c對大鼠凝血參數的影響，現報道如下。

1、材料與方法

1．1實驗藥物

P1c由上?？齐纳锕こ逃邢薰竞铣?，肝素鈉注射液由江蘇萬邦生物醫藥有限公司提供。

1．2動物

雄性SD大鼠30只，體重250～280g，購自浙江省實驗動物中心，動物許可證號為SCXK\\(浙\\)2008-0033。

1．3實驗方法

將大鼠隨機分為5組，每組6只，分別為生理鹽水組\\(給予等體積的生理鹽水\\)，肝素鈉\\(50U·kg－1\\)組，低、中、高劑量P1c\\(P1c2、4、8mg·kg－1\\)組，給藥容積為0．5ml·\\(100g\\)－1，均股靜脈注射給藥。每天1次，連續5d。末次給藥后30min以5%水合氯醛0．7ml·\\(100g\\)－1腹腔注射麻醉大鼠，5min后腹主動脈取血4ml置入藍色帽的vacuette抗凝管\\(3．8%枸鹽酸鈉1∶9抗凝\\)中，顛倒混勻，以3000r·min－1離心10min。將離心好的標本試管編號，放于樣本托架上。

檢查血凝儀配套試劑和每日質控，檢測凝血酶原時間\\(PT\\)、活化部分凝血活酶時間\\(APTT\\)、凝血酶時間\\(TT\\)以及纖維蛋白原\\(FIB\\)，記錄結果。

1．4統計學處理

所有數據均采用x±s表示，組間比較比較采用t檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2、結果

見表1。

凝血參數肝素鈉組與生理鹽水組比較，差異有統計學意義\\(P＜0．05\\)，肝素鈉顯著延長凝血時間，降低纖維蛋白原含量，顯示出強大的抗凝作用。凝血參數低、中、高劑量P1c組與生理鹽水組比較，差異無統計學意義\\(P＞0．05\\)，說明P1c對大鼠的PT、APTT、FIB和TT沒有直接作用。

3、討論

研究表明，整合素αⅡbβ3是血小板膜的主要受體，不但參與血小板的黏附、聚集等，同時也介導了血小板的信號轉導，是血小板活化、聚集的最終共同通路。阻斷整合素αⅡbβ3可以有效地抑制各種激動劑誘導的血小板聚集，是抗血栓治療的理想靶點。但受體拮抗劑主要的潛在不良反應是出血，使得這類藥物未能較好地在臨床推廣。

在前期的研究中證實，P1c可以有效地減少ADP誘導的血小板的聚集，也可以抑制ERK1/2的磷酸化，證實P1c與αⅡbβ3結合及其可能的作用原理是通過抑制ERK1/2的磷酸化而實現的，P1c對大鼠動靜脈旁路血栓形成的影響從體內水平證實了P1c抗血栓形成的有效性。P1c是人源性小肽，為了更好的闡明其對凝血系統的安全性，本實驗首次觀察了P1c對大鼠凝血參數的影響。

經典瀑布學說認為，凝血過程是一系列的酶促反應，其中包括內源性、外源性途徑和共同通路，最后使纖維蛋白原變為纖維蛋白，血液由溶膠狀態變為凝膠狀態。PT值是反映外源性凝血因子是否異常的指標，同時用于監測口服抗凝劑的用量，是監測口服抗凝劑體內水平的首選指標;APTT值是反映內源性凝血因子是否異常的指標;而TT值則主要反映凝血共同途徑FIB轉變為纖維蛋白的過程中，是否存在異?？鼓F象的指標。FIB即凝血因子Ⅰ是凝血過程中的主要蛋白質，含量與凝血酶活性有關，在血栓形成過程中，凝血酶的激活是主要因素之一。PT、APTT和FIB三者同時監測已被臨床用于篩查患者的凝血機制是否正常。通過大鼠體內實驗研究發現，具有抗凝血作用的肝素鈉可以顯著延長凝血時間和降低FIB含量，顯示出強大的抗凝作用\\(P＜0．05\\)。而對大鼠進行連續5d給予低、中、高劑量的P1c后，測定的凝血參數結果顯示，低、中、高劑量的P1c與生理鹽水組比較差異均無統計學意義\\(P＞0．05\\)，表明P1c不改變大鼠凝血參數PT、APTT、FIB和TT，不影響大鼠的凝血功能。

總之，目前已有多種以血小板αⅡbβ3整合素為靶點的抗血小板藥的報道，其中部分已經應用于臨床，如阿昔單抗和依替巴肽靜脈給藥用于急性冠脈綜合征患者經皮冠脈介入短期治療。本研究結果為進一步研究P1c抗血小板及抗血栓作用提供了實驗基礎。