藍莓\\(Vaccinium ashei\\),杜鵑花科越橘屬,多年生落葉或常綠灌木。藍莓果實富含多種維生素,在水果中其花青苷活性最高,易被人體吸收,對眼睛有良好的保健作用,還富含豐富的鈣、鐵、磷等礦質元素[1],具有防止腦神經衰老、增強心臟功能、明目及抗癌等獨特功效,國際糧農組織將其列為人類五大健康食品之一,譽為“漿果之王”[2]。
藍莓的新品種選育手段主要依附于常規雜交育種,隨著現代科技的不斷發展,更多的藍莓育種手段應運而生,比如:分子標記技術和轉基因技術等。藍莓種子有較強的休眠特性,對發芽造成很大的影響[3]。且藍莓種子體積小,直播發芽率低,不易成活。成苗后,苗弱小,不易煉苗。采用組織培養,可以增加種子的發芽率,亦可研究探索打破藍莓種子休眠規律的環境條件,有利于保護資源,提高經濟價值。
目前,有關藍莓莖段組織培養的經驗報道很多,但藍莓種子的組織培養以及低溫處理、機械處理和培養基配方對發芽率的影響的研究很少。所以,這次試驗將在以往研究的基礎上,就低溫、機械處理和培養基配方對藍莓種子發芽率的影響進行研究,篩選出適合藍莓種子萌發的最佳組合。為生產上提供優良的實生種苗和加快藍莓苗木的繁殖提供技術參考。
1 材料與方法
1.1試驗材料
試驗所用充分成熟、飽滿的藍莓種子采自遼東學院農學院園藝實訓基地藍莓園。將種子分成若干小包,用塑料袋包好放入冰箱冷藏,記錄冷藏時間。
1.2試驗內容和方法
將低溫儲藏的藍莓種子放入無菌瓶中,加入95%的酒精滅菌6~8s,然后將酒精倒出,加入0.1%氯化汞滅菌6~8min,用無菌水進行清洗6~7次,無菌紙上濾干待用。
1.2.1不同低溫儲藏時間發芽率試驗
從藍莓植株上摘取成熟果實,收集飽滿種子,分別低溫貯藏五周、六周、七周、八周,同一天接種到1/3MS培養基上進行培養,每瓶10粒,每處理10瓶,三次重復。40d后調查不同處理發芽率。
1.2.2刻分播種與完整播種發芽率試驗
取低溫貯藏五周的種子,采用刻分種子與完整種子接種到1/3MS培養基上進行培養,每瓶10粒,每處理10瓶,三次重復。40d后調查不同處理發芽率。
1.2.3不同培養基的發芽率試驗
取低溫貯藏五周的種子,分別接種到1/3MS、1/3MS+NAA0.01mg/L、1/3MS+NAA0.01mg/L+ZT0.1mg/L、1/3MS+NAA0.05mg/L和1/3MS+NAA0.05mg/L+ZT0.5mg/L等五種培養上,40d后調查不同處理發芽率。
2 結果與分析
2.1不同低溫儲藏時間對發芽率的影響
2.1.1方差分析
對不同低溫儲藏時間發芽率調查數據進行方差分析,見表1。
2.1.2差異顯著性檢驗
對發芽率平均值進行差異顯著性檢驗,見表2。
表2說明,低溫儲藏八周發芽率最高,達10.8%,而低溫儲藏五周的發芽率僅為3.7%。低溫儲藏八周與六周、五周均達到了極顯著差異。低溫儲藏八周與低溫儲藏七周達到了顯著差異,即低溫儲藏八周發芽率最高;低溫儲藏七周發芽率較高;低溫儲藏六周、五周發芽率最低。
2.2刻分播種與完整播種對發芽率的影響
2.2.1方差分析
對刻分播種與完整播種發芽率數據進行方差分析,見表3。
表3表明,處理間發芽率差異極顯著。
2.2.3差異顯著性檢驗
對發芽率平均值進行差異顯著性檢驗,見表4。
表4說明,經過刻分處理的發芽率達11.9%,而完整接種的種子發芽率僅有3.7%?？谭植シN與完整播種達到了極顯著差異,即刻分接種發芽率最高。
2.3不同培養基對發芽率影響
2.3.1方差分析
對不同培養基發芽率數據進行方差分析。見表5。
表5表明,處理間發芽率差異極顯著。
2.3.2差異顯著性檢驗
對發芽率平均值進行差異顯著性檢驗,見表6。
表6說明,處理E發芽率最高,達到了16.9%,處理E與C、D、B、A均達到了極顯著差異;處理C與處理D、處理B與處理A、處理B與處理D差異不顯著,處理A發芽率最低為3.7%。
即1/3改良的MS培養基為基本培養基,NAA濃度為0.05mg/L、ZT濃度為0.5mg/L發芽率最高。
3 結論
試驗結果表明,不同低溫儲藏時間、刻分播種與完整播種、不同的培養基配方,均對藍莓種子組織培養的發芽率有影響。低溫儲藏八周發芽率最高;低溫儲藏七周發芽率較高;低溫儲藏六周、五周發芽率最差。對藍莓種子進行刻分發芽率較高,不刻分發芽率較低。1/3改良的MS培養基為基本培養基,NAA濃度為0.05mg/L、ZT濃度為0.5mg/L種子發芽率最高,其他各處理發芽率較低。
通過本試驗得出藍莓種子組織培養的最佳處理組合為低溫儲藏八周、采用種子刻分播種、使用1/3改良MS+NAA0.05mg/L+ZT0.5mg/L配方的培養基。
參考文獻:
[1]張銘浩,楊晶,許孝瑞.新興果樹藍莓的發展前景與栽培技術[J].落葉果樹,2011\\(2\\):20-22.
[2]烏鳳章,王賀新,陳英敏,等.我國兔眼藍莓生理生態研究進展[J].北方園藝,2006\\(3\\):48-49.
[3]張華微,欒雨時,張勻.促進越橘種子發芽的研究[J].北方園藝,2006\\(5\\):41-42.
