目前認為，慢性阻塞性肺疾病 （COPD） 的發病機制與氣道炎癥有關，同時蛋白酶 - 抗蛋白酶失衡、氧化 - 抗氧化失衡亦起重要作用?？寡趸委熓悄壳胺乐蔚闹匾悬c之一。滇白珠為我國西南地區使用的草藥，在湖南西部也有分布。研究證明，滇白珠含有機酸、苷類、黃酮類、木脂素、槲皮素類等多種化合物，具有活血化瘀、通絡止痛、清熱解毒等功效，用于治療慢性氣管炎、風濕性關節炎、風寒感冒等.本研究利用滇白珠水提物干預 COPD 大鼠后檢測超氧化物歧化酶（SOD） 活力和丙二醛 （ MDA） 濃度的變化，探討滇白珠水提物對 COPD 氧化應激的影響。
1 材料與方法
1. 1 實驗動物 選取雄性 SD 大鼠 36 只 （ 湖南省長沙市開福區東創實驗動物科技服務部購買，編號 HNACSDC20120292），鼠齡 12 周； 平均體質量 （278. 0 ± 26. 0） g.將大鼠隨機分為對照組、模型組和用藥組，各 12 只。
1. 2 COPD 模型制備 采用氣管內兩次注入脂多糖 （ LPS） 和反復煙熏的方法制作 COPD 大鼠模型.在第 1、14 天向 3 組大鼠氣管內緩慢注入 LPS 200 μg （200 μl），將其放入自制的有機玻璃煙熏箱內，在右上角開通 1 個直徑 1 cm 的通氣孔。
將點燃的香煙 （長沙卷煙廠生產的白沙牌香煙） 通過三通管將煙霧吸入 100 ml 的注射器中，關閉吸煙通路一端，再打開三通管的另一端將煙霧注入煙熏箱內進行大鼠被動吸煙，2 次/ d,16 支 / 次，30 min / 次，2 次間隔 4 h 以上。用藥組吸煙 8 d后，于每天吸煙前利用灌胃針給大鼠灌滇白珠水提物 1. 0 g/kg,加 0. 9%氯化鈉溶液至 2 ml.對照組于同一時間灌胃等量0. 9% 氯化鈉溶液。3 組處理時間均為 28 d.
1. 3 滇白珠水提物提取 滇白珠采集于湖南省湘西鳳凰臘爾山鎮兩林鄉。稱取滇白珠干燥全株 800 g,切碎，浸泡，水煎3 次，30 min / 次，合并水濾液，濃縮為 1 g / ml （ 生藥），得到滇白珠水提物。
1. 4 支氣管肺泡灌洗液 （ BALF） 收集 將大鼠麻醉后仰臥固定于操作臺，切開胸部后暴露氣管及雙肺，結扎右主支氣管，用套管針穿刺至左肺，反復 3 次緩慢注入 3 ml 無菌 0. 9%氯化鈉溶液后，回吸并用紗布過濾，得到 BALF.
1. 5 SOD 活性和 MDA 濃度測定 試劑盒均購自武漢博士德生物有限公司，檢測方法按試劑盒說明書進行。血漿 MDA 測定采用硫代巴比妥酸比色法，酶性抗氧化劑 SOD 活性測定采用化學比色法。
1. 6 病理標本處理 取右肺下葉，4% 中性多聚甲醛固定，石蠟包埋，蘇木精 - 伊紅染色 （HE），光鏡下觀察形態學改變。
1. 7 統計學方法 采用 SPSS 13. 0 軟件包進行統計學分析，計量資料以 （x ± s） 表示，多組間比較采用方差分析，以 P <0. 05 為差異有統計學意義。
2 結果
2. 1
3 組肺組織血漿 SOD 和 MDA 比較 3 組肺組織血漿 SOD和 MDA 濃度比較，差異均有統計學意義 （P <0. 05）； 其中對照組 SOD 濃度高于用藥組，用藥組 SOD 濃度高于模型組，差異均有統計學意義 （P < 0. 05）； 模型組 MDA 濃度高于用藥組，用藥組 MDA 濃度高于對照組，差異均有統計學意義 （P< 0. 05,見表 1） .【表1】
2. 2
3 組 BALF 中 SOD 和 MDA 比較 3 組 BALF 中 SOD 和MDA 濃度比較，差異均有統計學意義 （ P < 0. 05）； 其中對照組 SOD 濃度高于用藥組，用藥組 SOD 濃度高于模型組，差異均有統計學意義 （P < 0. 05）； 模型組 MDA 濃度高于用藥組，用藥組 MDA 濃度高于對照組，差異均有統計學意義 （P <0. 05,見表 2） .【表2】
2. 3 病理改變
肉眼觀察模型組大鼠可見肺顏色蒼白，體積增大。HE 染色光鏡下觀察，可見支氣管黏膜上皮脫落、纖毛倒伏，管壁大量的淋巴細胞、單核巨噬細胞浸潤，肺泡擴張，有大囊泡形成。用藥組大鼠炎癥程度輕，肺泡壁斷裂、大囊泡形成少.
3 討論
目前，COPD 的發病機制仍未完全闡明，其發生涉及多個方面，大量研究表明氧化應激在 COPD 發生機制中起到重要作用。氧化應激是指由于氧化劑增多和/或抗氧化劑減少導致的氧化/抗氧化失衡狀態。MDA 是氧化過程中最終產物之一，由不飽和脂肪酸分解而來，包含 3 個或多個雙鍵.1997 年，我國學者用動物模擬 COPD 模型證明了血清 MDA 濃度明顯升高.本研究在建模過程中應用滇白珠水提物干預后發現用藥組大鼠肺組織血漿和血清 MDA 濃度較模型組明顯降低，較對照組升高，表明滇白珠水提物可以減輕 COPD 氣道氧化損傷，改善慢性炎癥。病理學切片顯示支氣管和肺組織病理損傷較模型組減輕，說明滇白珠水提物在一定程度阻止 COPD 病理進程。
SOD 是機體清除超氧陰離子惟一的抗氧化酶，在一定程度上表示了機體的抗氧化能力.本研究結果表明，與對照組相比，模型組大鼠 BALF 和血漿 SOD 降低、MDA 升高，提示存在氧化應激損傷。與模型組比較，用滇白珠水提物干預后的大鼠 BALF 和血漿 MDA 降低、SOD 升高，從而提示滇白珠水提物在一定程度上能夠改善 COPD 大鼠的氧化應激程度，對COPD 的治療有一定作用。
綜上所述，滇白珠水提物可以下調 COPD 的 MDA 表達，升高 SOD 活性，減輕和控制氣道氧化應激反應，進而控制病情的發展，為臨床治療 COPD 提供新的方法和思路。
參考文獻
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