免疫組織化學染色技術是抗原和抗體相結合的免疫反應，通過免疫組織化學反應，使得存在于細胞中的特異性抗體顯示出來，有利于在顯微鏡下觀察診斷。為了研究免疫組化學技術在病理組織中的應用情況，選擇60 例腫瘤患者進行了相關研究。
1 資料與方法
1. 1 臨床資料 選擇 2011 年 1 月 ～ 2013 年 1 月住院患者60 例進行研究，男性患者 35 例，女性患者 25 例，患者年齡在 25 ～ 60 歲，平均為\\( 41. 2 ± 3. 7\\) 歲，其中有肝細胞肝癌12 例，轉移性腫瘤 38 例，肝內膽管癌 7 例，血管瘤 3 例，平均病程為 9 個月。全部患者診斷臨床均符合 WHO 制定的診斷標準。所有患者均對本次研究知情，以隨機標準將全部患者平均分成對照組和研究組，對比兩組患者性別、年齡、疾病類型資料，無顯著差異\\( P ＞0. 05\\) 。
1. 2 研究方法 對照組采用穿刺活檢。觀察組應用免疫組化技術，具體如下:
1. 2. 1 研究試劑 ①10% 中性緩沖甲醛固定液; ②脫水液; ③透明液; ④浸蠟液; ⑤蒸餾水; ⑥UltrasenSitiveTM SP試劑; ⑦中性樹膠。以上試劑全部由福州邁新生物技術開發有限公司提供。
1. 2. 2 免疫組化方法 ①固定切片: 每例病例取一塊組織，大小為1 cm × 2 cm × 0. 2 cm，采用 10% 中性緩沖甲醛固定液將其固定2 h，用脫水液脫水1 h，透明液透明1 h，浸蠟液1 h，之后進行石蠟包埋，采用常規切片方法切片，厚度為2 μm; ②免疫組化染色: 將固定好的切片脫蠟后用 3% 的雙氧水在室溫下孵育10 min，后用蒸餾水洗滌3 min，共進行 3 次，之后用高壓鍋修復2 min，高壓鍋溫度為 110℃，PBS 洗滌5 min，共進行 3 次，加入滴一抗，室溫 37℃ 下孵育2 h，PBS 洗滌同上，加入 UltrasenSitiveTM 試劑，37℃ 孵育20 min，PBS 洗同上，之后進行 DAB 顯色，蒸餾水沖洗，蘇木精復染核60 min，行梯度乙醇脫水、二甲苯透明后，用中性樹膠封固。
1. 3 陽性診斷標準 免疫組化染色呈棕黃色為陽性。
2 結果
經免疫組化染色后 30 例患者當中的大部分患者的細胞結構都呈變異型性，28 例患者的 AFP\\( α － Fetoprotein\\) 、Glypican － 3 均呈陽性，陽性率為 93. 3% ，與手術檢查結果一致，而穿刺活檢中，AFP\\( α － Fetoprotein\\) 、Glypican － 3 陽性 20 例，陽性率為 50. 0%，差異顯著\\( P ＜0. 05\\) 。12 例肝細胞肝癌患者經免疫組化診斷 6 例，確定 3 例患者已無法進行手術治療，之后對這 3 例患者隨訪，發現 2 例患者已死亡，死亡率為 66. 7%; 7 例肝內膽管瘤患者行免疫組化 4例，其 CK7、CK20、CK1 呈陽性，陽性率 100%，后期 3 例患者死亡，死亡率為 75. 0%; 38 例肝臟轉移性腫瘤患者行免疫組化 19 例，均找到了原發灶，陽性率 100%，后期死亡，14 例; 3 例血管瘤患者經免疫組化 2 例，實施血管瘤手術，后期隨訪并無復發現象，死亡 1 例，治療成功率為 50. 0%。
3 討論
免疫組織化學技術是病理診斷中的常見方法，尤其在各種腫瘤的診斷中具有較高的診斷準確率。研究中，共 60例腫瘤患者，30 例患者經免疫組化技術后，28 例患者的AFP\\( α － Fetoprotein\\) 、Glypican － 3 均呈陽性，陽性率為93. 3% ，這與臨床其他研究結果相似。在不同類型的腫瘤疾病中，也能獲得相對準確的判斷，本次研究中免疫組化技術在肝內膽管瘤、肝臟轉移性腫瘤、血管瘤中均獲得了較高的陽性率。
免疫組織化學染色是近些年來逐漸發展起來的病理技術之一，但它本身的操作很容易受到環境因素的影響，比如說固定劑、切片、抗原修復、溫度、時間和人為因素的影響，導致在病理診斷中出現不應有的誤診現象。因此，在操作的過程中，嚴格的按照標準去操作: ①組織固定: 目前在組織固定過程中選擇較多的 10% 中性緩沖甲醛固定液，相對于甲醛固定液，其固定較好，時間保持較久，能在60 d保持穩定的陽性率。②烤片: 推薦的溫度是在 60 ～68℃ 的恒溫箱中加熱，但是需要注意的是溫度不能過高;③抗原修復: 時間最好是在 5 ～ 8 min，噴汽之后的時間在2 min左右時，再把鍋端開，讓切片自然地冷卻下來，進行下一步驟的染色; ④染色: 在免疫組織化學染色時需要進行蘇木素的復染，蘇木素復染不應過深，如果過深，有可能會覆蓋住染色過淺的陽性細胞，影響正確的診斷。
免疫組化顯色是一種酶促的反應，它主要是經過和抗原抗體復合物的堿性磷酸酶和過氧化物酶與底物的反應，從而生成了有顏色的復合物，沉淀在組織和細胞中的抗原的位置。因為組織標本的來源的不同，抗原的含量不等，細胞的分化不一，所出現的顯色反應的時間也相應不同，在染色的過程中需要對如下方面加強注意: ①在整個染色中，切片要始終保持濕潤; ②在孵育過程中要合理確定孵育盒中的蒸餾水量; ③在加抗體中，選擇單克隆抗體;④在孵育盒中孵育時，孵育盒要放平，包成抗體液體在組織上的均勻性，避免抗體液體流到組織一邊，出現假陰性結果。
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