“生肌白玉膏”為甘肅中醫學院附屬醫院院內制劑,主要作用是化腐生肌、消腫止痛、和血止血;主治一切癰疽瘡毒,皮膚潰瘍久不收口,燙\\(燒\\)傷等外科疾患。為進一步探討生肌白玉膏對深Ⅱ度燒\\(燙\\)傷創面的作用機制,本實驗運用現代醫學實驗方法進行了生肌白玉膏對大鼠深Ⅱ度燙傷創面愈合及病理組織學的實驗研究。
1、材料和方法
1.1材料
SPF級Wistar大鼠80只,雌雄各半,體重180g±20g,甘肅中醫學院SPF實驗中心提供。生肌白玉膏,由甘肅中醫學院附屬醫院提供;美寶濕潤燒傷膏\\(汕頭市美寶制藥有限公司\\),生理鹽水\\(四川科倫藥業有限公司\\)。實驗儀器:雙目倒置顯微鏡、顯微攝像系統。
1.2方法
1.2.1造模
造模前大鼠禁食12h,自由飲水1d,用脫毛膏在大鼠背部脫毛,面積均約3cm×3cm大小,清水洗凈,擦干。除空白組外,其余3組以10%水合氯醛300mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,其背部浸入直徑3cm,溫度95℃的燒瓶中約10s,造成大鼠深II度燙傷\\(經病理證實\\)。燙傷后3組均以林格氏液30mL/kg腹腔注射,抗休克治療。
1.2.2分組及給藥
造模成功后,將80只大鼠稱重,體重由小到大的順序編號,按照隨機數字表進行分組,空白組8只,實驗組、對照組、模型組各24只,分別涂抹生肌白玉膏1g、美寶濕潤燒傷膏1g、生理鹽水。2次/d,連續給藥至處死前1d??瞻捉M不予以任何處理,正常飼養。
2、實驗指標及檢測方法
2.1創面愈合率
創面面積測量:造模后第3d、7d、14d、21d用數碼相機對創面進行拍照,拍攝時鏡面與創面保持平行,鏡面距創面約15cm,并在創面邊緣放一刻度尺,拍照后將照片存入電腦,記錄拍照日期及分組情況,用圖像處理分析系統利用測定像素比例測出創面面積。創面愈合率\\(%\\)=\\(原始創面面積-未愈合創面面積\\)/原始創面面積×100%。
2.2病理組織學觀察
于燙傷后第3d、7d、14d、21d,每個時間點處死6只大鼠\\(空白組于第3d一次性處死\\),取創面組織標本,10%甲醛固定,石蠟包埋,制作芯片,進行HE染色后,光鏡\\(400倍\\)觀察炎癥反應情況、毛細血管數量、成纖維細胞數量及膠原纖維情況。
2.3統計學方法
采用SPSS17.0統計軟件,各組創面愈合率及病理組織觀察均采用單因素方差分析比較組間的差異是否具有統計學意義;P<0.05表示差異有統計學意義,P<0.01表示有顯著性差異。
3、結果
3.1創面愈合率
實驗組與模型組比較有顯著差異\\(P<0.01\\),實驗組與對照組比較差異有統計學意義\\(P<0.05\\),對照組與模型組差異有統計學意義\\(P<0.05\\),結果見表1。
3.2病理組織學觀察
傷后第3d3組創面炎癥反應均較輕\\(+\\),可見壞死和滲出,毛細血管數量及成纖維細胞數量較少。傷后第7d實驗組炎癥細胞增多\\(++\\),毛細血管及成纖維細胞數量增多,出現少量膠原纖維。傷后第14d、21d炎癥反應較重\\(++~+++\\),毛細血管及成纖維細胞數量明顯增多于模型組\\(P<0.01\\),膠原纖維數量明顯增多。結果見表2、3,圖1、2、3。
4、討論
生肌白玉膏由熟石膏、爐甘石、紫草、當歸、甘草、冰片、麻油等組成。熟石膏、爐甘石具有清熱解毒瀉火、收濕斂瘡止血、祛腐生肌的作用特點?,F代藥理證實石膏中所含Ca2+能抑制神經肌肉興奮性,減少血管通透性作用,有鎮痙、抗滲、過敏、抗炎作用。爐甘石能在創面局部形成一層保護膜,使局部皮膚氧化收斂,促進血液循環,保持干燥,改善缺血、缺氧,促進創面愈合。
紫草有清熱解毒、涼血止血、殺菌止癢之功效;現代藥理實驗表明,紫草提取物具有較好的抗菌、抗炎、抗過敏、等作用;對金黃色葡萄球菌、化膿桿菌、大腸桿菌有抑制作用,并加速黏膜上皮生長,涼血、活血、清熱、解毒的功效。冰片能清熱解毒止痛生肌?,F代醫學研究表明,冰片具有抗菌、抗炎、止痛的功效。甘草具有補脾益氣、緩急止痛、緩和藥性功效;具有調節機體免疫功能,抗炎、抗過敏等作用。當歸具有活血潤膚,其提取物具有美白、清除自由基的功效。麻油味甘,性微寒,具有消癰腫、補皮裂、止痛生肌等功用,為創面修復、早期愈合創造了有利條件。諸藥合用,對癰疽瘡毒,皮膚潰瘍久不收口,燙\\(燒\\)傷等外科疾病有很好的療效。
參考文獻:
[1]楊軍,劉曉瑾.大鼠燙傷創面模型的制備和創面觀察[J].陜西醫學雜志,2009,38\\(7\\):794.
[2]賴智捷,鞏江,路鋒,等.石膏藥學研究新進展[J].遼寧中醫藥大學學報,2011,13\\(3\\):42.
[3]陳新謙,金有豫,湯光.新編藥物學[M].北京:人民衛生出版社,2007:1883.
[4]李治建,周凡,斯拉甫·艾白,等.紫草藥理作用研究進展[J].中國中醫藥信息雜志,2010,17\\(11\\):111.
[5]李世東,李世敏.復方紫草涂膜劑的制備及臨床應用[J].中成藥,2006,28\\(7\\):1091.
[6]吳壽榮,程剛,馮巖.冰片藥理作用的研究進展[J].中草藥,2001,32\\(12\\):1143.
[7]王雪明,王德隆.復方甘草酸銨凝膠劑制備[J].中國藥師,2007,10\\(7\\):675.
[8]高瑞英,黨志,鄒穎楠,等.當歸提取物抗皮膚衰老及美白功效體外實驗研究[J].時珍國醫國藥,2010,21\\(4\\):874-875.