在病理科日常工作中,病理醫師對送檢標本取材后,病理技師需將待檢標本進行固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、染色、封片等步驟,以上總稱為病理制片。其中,透明與染色兩步操作中均需使用透明劑對標本進行處理,透明效果直接影響制片質量。二甲苯是常用的組織透明劑,但因其毒性、刺激性氣味及環境污染等弊端,均需一種替代產品。近年來,各醫院病理科正逐步使用一種新型環保生物組織透明劑\\(TO試劑\\),筆者結合本科室使用該試劑的效果介紹如下。

1、材料與方法

1.1材料選取

2009年1月—2012年12月臨床送檢標本,包括腦、眼球、甲狀腺、扁桃體、淋巴結、腎臟、乳腺、骨、軟骨、食管、胃、腸、子宮等組織,TO試劑由上海宏茲實業有限公司生產提供,二甲苯由成都市科龍化工試劑廠生產提供。

1.2方法

1.2.1組織處理

按常規程序進行固定、脫水、透明、浸蠟來處理組織。其中,透明過程用TO試劑Ⅰ、TO試劑Ⅱ和二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ進行對照。組織包埋、切片后,染色中同樣使用TO試劑Ⅰ、TO試劑Ⅱ和二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ進行對照。

1.2.2制片質量

把脫蠟干凈、透明度好、著色適中、顏色鮮亮的切片劃歸為優質片,其次為良好片,再次為差片。

1.3統計學方法

應用SPSS17.0統計軟件將兩種試劑制片各級制片數進行比較,經檢驗兩種試劑差異無統計學意義\\(P>0.05\\)。

2、結果

將10 000張切片進行比較后,兩種試劑制片質量見表1。

3、討論

二甲苯為無色透明液體,與乙醇、液狀石蠟、氯仿等可以互溶,沸點為137~140℃,易揮發,有刺激性氣味,為中等毒性物質,具有一定致癌性,可對環境造成一定污染。二甲苯結構中含有苯環,屬于芳香烴類化合物,長期處于二甲苯環境中可對機體產生危害,二甲苯可經皮膚、呼吸道、消化道吸收,蓄積于腎臟、骨髓等器官。輕癥造成自主神經功能紊亂、造血功能下降,重癥可致再生障礙性貧血等。病理科工作人員長期暴露于二甲苯環境中,尤其是在快速石蠟制片中,二甲苯需要在加熱條件下使用,更加快了二甲苯的揮發,極易引發以上疾病,造成職業性損害?；谝陨显?研究一種新型無毒試劑替代二甲苯成為一項課題,有研究報道松節油替代二甲苯,但單獨使用松節油透明效果遠差于二甲苯,并且長時間使用造成松節油黏稠,而不易洗脫。

TO試劑是一種新型生物組織透明劑,其主要以醇類為稀釋劑,不含芳香烴類化合物,不產生對人體有害物質,對環境也不造成污染。組織在梯度乙醇脫水后進入浸蠟環節,但乙醇與石蠟不相溶,則乙醇與石蠟間需要一種溶劑作為“橋梁”,該試劑能夠與乙醇及液態石蠟互溶,起到“橋梁”作用。TO試劑與二甲苯均對組織有收縮作用,本研究中發現,只要控制透明時間,作用時間適當,TO試劑對組織的收縮作用不致影響組織正常結構。

TO試劑能夠很好溶解制作切片組織中的石蠟,因此,能替代二甲苯用于石蠟切片染色前的組織脫蠟。制作的病理切片組織細胞結構好、核質分明、能夠較好顯示出細胞及組織結構。在使用過程中需注意以下幾點:第一,脫水過程中,乙醇濃度應由低到高,根據組織大小、厚薄調整脫水時間。第二,初次使用TO試劑時應同時更換無水乙醇及石蠟。第三,染色過程中切片脫蠟可適當使用微波爐加熱切片,以提高脫蠟效果。

以上研究表明,在病理技術工作中該新型環保生物組織透明劑能夠替代二甲苯,病理切片優良率較高,能夠達到臨床病理診斷和科研要求,同時也符合實驗室環保要求及減少病理工作者身體損害。

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